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關(guān)于自動進樣器在HPLC分析中的應(yīng)用

更新時間:2017-03-27 瀏覽次數(shù):[2132]
自動進樣器在生化分析儀器,色譜分析儀器中有著廣泛應(yīng)用,它的運行可靠性和性直接影響著分析結(jié)果。液相色譜系統(tǒng)大多使用自動進樣器引入樣品,正確使用自動進樣器是保證液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件,用自動進樣器注入適當(dāng)體積的標(biāo)準(zhǔn)樣品可為峰高和峰面積的測量提供小于1%的標(biāo)準(zhǔn)偏差。  
對于液相色譜而言,無論是手動進樣器或是自動進樣器都是用六通閥進樣的,只是自動進樣的較手動進樣器的死體積較大,多了計量泵和一部分聯(lián)接管線。自動進樣器可以減少體力勞動,增加樣品處理量,提高日常工作精度。  
現(xiàn)在的色譜實驗室,大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復(fù)性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC分析進樣方式可分為:隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。  
1.隔膜進樣。  
用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計的與色譜柱相連的進樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得*的柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),使進樣重復(fù)性只能達到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。  
2.停流進樣。  
可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點是保留時間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。  
3.閥進樣。  
一般HPLC分析常用自動進樣器六通進樣閥,其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進樣量準(zhǔn)確,重復(fù)性好(0.5%),操作方便。

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